Description

Das Endoplasmatische Retikulum ist der Syntheseort von Antikörpern. Die Faltung und Assemblierung dieser komplexen, disulfidverbrückten Proteine ist von großer Wichtigkeit für höhere Eukaryonten. Viele Faltungshelfer sind direkt oder indirekt an der Faltung von Antikörpern beteiligt. Proteindisulfidisomerasen sind für die Ausbildung und Umlagerung von Disulfiden verantwortlich, Hsp70- und Hsp90-Homologe Bip bzw. Grp94 verhindern Aggregation. Weiterhin werden diese Proteine durch eine Anzahl von Interaktionspartnern unterstützt, diese Aufgaben auszuführen. In dieser Arbeit wurde in einem zellfreien auf E. coli basierenden Expressionssystem die Synthese eines vollständig assemblierten IgG etabliert. Zudem wurde der Einfluss verschiedener ER-residenter Faltungshelfer auf die Rückfaltung des Fab-Fragmentes des IgG untersucht und Grp94 strukturell und funktionell charakterisiert.